Nội dung của phim Nữ Tuần Án xoay quanh cô gái tên Bao Tú Tú, có chồng là Văn Tất Chính – một thư sinh nghèo, chồng cô đã rời bỏ vợ con lên kinh thành ứng thí để có một cuộc sống tốt hơn với vợ con, thế nhưng anh ta đã một đi không trở lại. Bao Tú Tú ở quê một mình nuôi con, vì muốn tìm chồng nên dẫn con đi phiêu bạt giang hồ, mãi võ kiếm sống. Một lần đang mãi võ thì thấy kiệu quan đi ngang, nghi ngờ là Văn Tất Chính nên lẻn vào phủ xem. Thì ra đúng là người chồng đã biệt vô âm tính bấy lâu nay. Văn Tất Chính giờ đây không những đã đâu trạng nguyên, được phong là Bát phủ tuần án, mà bên mình còn có một ngừơi vợ xinh đẹp, trẻ trung. Từ khi Bao Tú Tú đến, nhiều chuyện phát sinh giữa hai bà vợ làm Bát phủ tuần án cũng phải điên đầu.
Không được bao lâu thì Văn Tất Chính bị người của Lạc Vương Gia ám sát vì ông nhận lệnh mở kho lương thực cứu đói cho dân mà Lạc Vương Gia muốn giữ của không muốn mở kho nên hãm hại ông. Ông mất khi chưa mở được kho cứu đói cho dân. Trong lúc bị truy sát, Tiểu Bảo cũng bị lạc mất, bị Lạc Vương Gia bắt giữ. Dân tình đói khát, chết vô số kể, cảnh ngộ rất thương tâm. Trong tình thế nguy cấp đó, Lưu sư gia tài trí đã nghĩ ra một cách là để vợ Tất Chính – Bao Tú Tú giả dạng làm Văn Tất Chính, đến Lạc phủ đòi mở kho lương thực cứu dân.
Vì không có ai biết mặt Văn Tất Chính, Bao Tú Tú vốn làm nghề mãi võ kiếm sống nên rất giỏi trong việc giả nam trang. Lưu Phi ra sức huấn luyện cho Bao Tú Tú từ cách đi đứng, ăn nói, cách ứng phó trong quan trường. Tuy nhiên, điều khó khăn nhất lúc này chính là việc Bao Tú Tú lại không biết chữ, vì thế mà không thể nào không có Lưu sư gia bên cạnh. Sau khi trải qua nhiều khó khăn, nguy hiểm, cuối cùng Bao Tú Tú và Lưu Phi cũng xoay sở qua mặt đựơc Lạc Vương Gia, mở kho lương cứu đói cho dân và cứu Tiểu bảo ra.